Вирусная нагрузка при гепатите В: методы определения, расшифровка показателей

Согласно данным статистики ВОЗ, от гепатита В умирают чаще, чем от ВИЧ или «ласкового убийцы» — гепатита С. Носителей HBV также на порядок больше — почти 25% земного населения (инфицированных HCV около 5%).

Такие данные — не повод для паники. Благодаря современным разработкам биофармацевтов гепатит В полностью излечим. Обязательное условие — прежде чем приступать к терапии, необходимо убедиться, что речь идет о патологии, вызванной вирусом и определить степень вирусной нагрузки.

Вирусная нагрузка при гепатите В: что это такое и зачем ее определять

Возбудитель гепатита В — вирус семейства Hepadnaviridae (род Orthohepadnavirus) был впервые выявлен в 1970 году при исследовании инфекций, вызывающих тяжелые патологии печени. Особенность HBV — поражает исключительно человеческий организм. Вирусный патоген выглядит как двухцепочная спираль ДНК, содержащая антиген HBcAg. Именно этот антиген, проникая в ядра клеток печени, разрушает их, делая невозможным самовосстановление органа.

Опасность заболевания в том, что даже при большом количестве патогена в крови и высокой скорости репликации (копировании патологичных цепочек), носитель не ощущает явных симптомов. То есть болезнь уже прогрессирует, а повода обследоваться у человека нет. Как результат: гепатит

В диагностируют либо в хронической форме, когда появляется дискомфорт в правом верхнем подреберье и проблемы с ЖКТ, либо на стадии фиброза печени, когда здоровая ткань начала рубцеваться, орган увеличился и начались необратимые изменения.

Патологичные цепочки ДНК могут копироваться с большей или меньшей скоростью, зависит от особенностей организма носителя, стойкости его иммунитета. Соответственно, вирусная нагрузка растет в укоренном темпе или месяцами остается неизменной.

Определять уровень вирусемии необходимо, чтобы:

• подтвердить развитие заболевания или его латентное состояние;
• разработать наиболее эффективную схему лечения;
• спрогнозировать результат выздоровления.

Какая вирусная нагрузка при HBV считается высокой, а какая низкой

Поводов для медикаментозного вмешательства нет, если клетки, измененные вирусом, не обнаружены или их число не превышает 0,8% от общего числа гепатоцитов. В остальных случаях речь идет о положительном результате (гепатит В выявлен и патоген продолжает распространяться).

• показатель ˂ 10³ копий /мл свидетельствует о минимальной вирусемии, вирусе в латентной или персистирующей фазе;
• о высокой нагрузке говорит цифра 10⁷ копий/мл и выше;
• если в результатах анализов на вирусную нагрузку стоит показатель ˂ 2*10⁴ копий/мл, то риск перехода в хроническую форму минимален, а число 2*10⁶ копий/мл показывает, что процесс хронизации уже запущен.

Также анализы на вирусную нагрузку при гепатите В показывают, насколько грамотно подобраны противовирусные препараты. Так, если по истечении 3-5 дней с начала терапии количество варионов уменьшается на 75-85%, лечение показывает хороший результат, если нагрузка увеличилась, препараты необходимо менять или дополнять другими средствами.

Почему важно своевременно обследоваться на вирусную нагрузку при HBV

Своевременно проведенные исследования помогут не только назначить эффективное лечение, но и предупредить развитие «сопутствующих» заболеваний. Помимо патологий, затрагивающих печень (фиброза, цирроза, печеночной карциномы, жировой дистрофии) HBV может способствовать развитию:

• почечной недостаточности;
• сахарного диабета;
• кожной атрофии;
• хронических воспалений сосудов;
• артритов и артрозов;
• заболеваний эндокринной системы;
• онкологических процессов в лимфатических тканях;
• альвеолита (поражение легких);
• хронического миокардита;
• отека головного мозга.

Кто должен профилактически обследоваться на вирусную нагрузку

Путь инфицирования — прямое попадание вируса в организм через биологические жидкости. В 90% случаев это кровь, но риск заражения через сперму, слюну, пот также существует.

Профилактика рекомендуется:

• наркоманам и лицам, оказывающим интимные услуги;
• людям, не использующим барьерные контрацептивы при беспорядочных половых связях;
• пациентам, пережившим переливание крови или посещавшим медучреждения с недостаточным уровнем санитарии;
• лицам, которые делали татуировки или пирсинг в нелицензированных салонах;
• медперсоналу и работникам учебных заведений.

Увы, но заразиться гепатитом В можно и в быту. Например, если использовать средства гигиены (зубную щетку, бритву или полотенце с остатками биологических жидкостей) носителя.

Методы определения вирусной нагрузки при HBV

Вирусная нагрузка определяется двумя способами: качественным и количественным. Задача первого — подтвердить/опровергнуть наличие возбудителя в крови, показать динамику распространения патогенна, форму заболевания.

Второго — показать число измененных вирусом ДНК цепочек в 1 мл биологической жидкости. Наличие вируса по специфичному антигену и антителам, которые вырабатывает человеческий иммунитет, определяют методом ИФА. Для лабораторной диагностики заболевания используют маркеры на:

• HBsAg — специфичный антиген, который появляется уже на этапе инкубации вируса.
• Анти-HBs — свидетельствует о том, что иммунитет вырабатывает антитела к гепатиту В. Может появиться после вакцинации или контакте с инфицированным, даже если в дальнейшем возбудитель самоуничтожится.
• HBeAg – маркер, по динамике которого можно судить о развитии болезни. Если число со временем падает, есть вероятность самоизлечения. Если растет — высок риск перехода болезни в хроническую форму
• Анти-HBe — показывает, что организм выработал иммунитет к вирусному воздействию.
• Анти-НВс — анализ на суммарные антитела HBcAg-IgM и HBcAg IgG.

Результат иммунологических исследований может выглядеть так:

Количественный анализ — наиболее достоверный способ определить вирусную нагрузку при гепатите В и исключить ошибочные результаты. Исследования проводятся методами:

• разветвленной ДНК;
• транскрипционной амплификации;
• полимеразной цепной реакции.

Все методики имеют сходный принцип — выявляется конкретный РНК с признаками вирусного изменения. Как показывает практика, ПЦР наиболее информативен при определении количества варионов.

Виды ПЦР на вирусный гепатит В

Полимеразная цепная реакция — это высокочувствительный метод, при котором патологичная РНК выявляется даже при минимальной концентрации вируса в крови.

Проводится качественным и количественным методом.

Качественное исследование проводится поэтапно:

• из сыворотки крови выделяется ДНК, которая помещается в специальные реагенты;
• подготовленный состав проходит через амплификатор, в котором температурный режим изменяется в 40 раз, способствуя росту числа измененных РНК-цепочек, если они есть;
• проводится процедура электрофореза — калибровка ДНК-участков по размерам, в материал добавляют реактив-краситель. Если обрабатываемый образец меняет оттенок, вирус обнаружен, если присутствуют разнородные ферменты, заболевание развивается.

Вариантов ответа может быть два: «обнаружено» или не обнаружено. При сомнительных результатах рекомендуется пересдача анализов через 1-2 недели.

Если качественная ПЦР подтверждает наличие возбудителя, то следующий шаг — определение вирусной нагрузки количественным методом. Такое исследование проводится для:

• прогнозирования развития вируса, скорости его воздействия на печень;
• составления эффективной схемы лечения и прогноза его успешности (чем меньше нагрузка, тем лучше возбудитель поддается медикаментозной терапии);
• определения чувствительности вируса к конкретным препаратам.

Врач-лаборант помещает ДНК, выделенную из крови в специальный состав, и считает количество измененных ферментов в 1мл биоматериала. По международным стандартом принят подсчет в МЕ/мл, но в российских лабораториях часто пишут результат в количествах копий на мл.

Расшифровка результатов количественной ПЦР

Возможен ли ошибочный результат

Ложноположительный или ложноотрицательный результат, а также неправильный подсчет количества копий вирусной ДНК может стать следствием ошибочных действий, как пациента, так и специалиста. Сомнительные или недостоверные результаты возникают вследствие:

• неграмотной подготовки к сдаче анализов (например, накануне пациент употреблял жирную пищу или лекарства, которые мешают нормальной свертываемости крови);
• несоблюдения правил забора биоматериала (нестерильная пробирка и др.);
• загрязнения и неправильного хранения биологического материала;
• нарушения хода постановки реакции или использование некачественных реактивов;
• присутствия в крови белковых и химических компонентов, которые вступают в реакцию с реагентами, используемыми в ПЦР.

Как снизить вирусную нагрузку при HBV

Гепатит В на сегодняшний день не поддается полному излечению. Пока не существует препаратов, которые гарантированно «убивают» вирус, но остановить репликацию и разрушительное воздействие вполне реально.

Для снижения вирусной нагрузки рекомендуют:

1. Противовирусную терапию (препаратами прямого противовирусного воздействия или интерфероном). Выбор терапии зависит от клинических показателей пациента и того, какие методики лечение предпочитает лечащий врач. У каждой из схем есть преимущества и недостатки, но практика ВОЗ показывает, что ингибиторы последнего поколения — Виреад, Телбивудин, Адефовир, Энтекавир — более действенны и оказывают меньшую медикаментозную нагрузку на печень и так ослабленную гепатитом.
2. Соблюдение режима питания. Печень — природный фильтр, который пропускает через себя все токсины. Чем меньше жирной пищи, сладкого, соленого и острого в рационе, тем легче органу «фильтровать» ферменты. Также на время лечения стоит полностью отказаться от алкоголя. Миф о том, что рюмка водки уничтожает патогенную флору, а бокал красного вина улучшает качество крови — опасное заблуждение. Даже 15 граммов спиртосодержащих напитков достаточно для выработки этанола, который является ядом для печени.

Несмотря на то, что гепатит B в хронической форме пока считается неизлечимым, держать болезнь под контролем и не допускать риска развития осложнений вполне по силам каждому человеку. Все, что для этого нужно — постараться вести здоровый образ жизни и не игнорировать лечение.

Рекомендуем чат в телеграмм, где вы можете получить ответы на свои вопросы о здоровье печени от врачей! Перейти в чат можно нажав эту ссылку.